Realtime PCR

实时荧光定量PCR技术是在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。该技术不仅实现了对DNA模板的定量而且具有灵敏度高、特异性和可靠性更强、能实现多重反应、自动化程度高、无污染性、具实时性和准确性等特点。

实验步骤：

1. 样品获取、处理和制备

1.1 悬浮细胞：将悬浮细胞1×106 个/mL培养液倒入离心管中，离心沉淀细胞。PBS冲洗2次，将细胞离心底部，向离心管中加入500-1000μl Trizol，然后置于-80度冰箱保存。或者将离心底部的干细胞置于-80度冰箱保存。

1.2 贴壁细胞：用胰酶消化细胞1×106个/mL，离心PBS冲洗2次，将细胞离心底部，向离心管中加入500-1000μl Trizol，然后置于-80度冰箱保存。或者将离心底部的干细胞置于-80度冰箱保存。

1.3 组织：采集新鲜组织100mg，放入离心管中，做好标记，于液氮冷冻片刻后，置于-80度冰箱保存。

1.4 血液：用抗凝管收集的全血1mL，加入RNA保护剂，做好标记，置于-80度冰箱保存。

2. RNA或DNA质控

3. 反转录

4. 引物验证

5. qPCR过程

6. 数据分析

我们提供：

1. 抽取的RNA和电泳图及逆转录的cDNA样本

2. 操作步骤及详细的试剂和耗材

3. 引物序列

4. 溶解曲线和扩增曲线

5. 原始数据及处理后的正式实验数据

实验器材：

结果示意图：

服务周期：

温馨提醒：

1. 细胞样本106以上，收集后-80度保存；组织标本100mg标本；血清或血液1mL以上，干冰运输

2. 单基因10个样本以上

3. 试验周期不包括探针、标准品合成时间

4. 公司默认的抽提方式TRIZOL，如果需要试剂盒抽提，则需要客户提供