逆转录聚合酶链反应（Reverse transcription PCR，RT-PCR），是将RNA的反转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板，利用变性，退火和延伸多步骤、多循环来扩增目的DNA片段。在该反应过程中，目的DNA产量呈指数增长，使一些极为微量RNA样品检测成为可能。
实验步骤：
1.样品获取、处理和制备
1.1 悬浮细胞：将悬浮细胞1×106 个/mL培养液倒入离心管中，离心沉淀细胞。PBS冲洗2次，将细胞离心底部，向离心管中加入500-1000μl Trizol，然后置于-80度冰箱保存。或者将离心底部的干细胞置于-80度冰箱保存。
1.2 贴壁细胞：用胰酶消化细胞1×106个/mL，离心PBS冲洗2次，将细胞离心底部，向离心管中加入500-1000μl Trizol，然后置于-80度冰箱保存。或者将离心底部的干细胞置于-80度冰箱保存。
1.3 组织：采集新鲜组织100mg，放入离心管中，做好标记，于液氮冷冻片刻后，置于-80度冰箱保存。
1.4 血液：用抗凝管收集的全血1mL，加入RNA保护剂，做好标记，置于-80度冰箱保存。
2.RNA或DNA质控
3.反转录
4.PCR扩增
5.琼脂糖凝胶电泳
我们提供：
1.抽取的RNA和电泳图及逆转录的cDNA样本
2.操作步骤及详细的试剂和耗材
3.引物序列
4.琼脂糖电泳图
5.原始数据及处理后的正式实验数据
结果示意图：
服务周期：
| 服务内容 |
说明 |
价格 |
实验周期 |
| RT-PCR |
提供目的基因片段 |
100元/基因/样 |
7个工作日 |
温馨提醒：
1.细胞样本106以上，收集后-80度保存；组织标本100mg标本；血清或血液1mL以上，干冰运输；
2.单基因10个样本以上；
3.试验周期不包括探针、标准品合成时间；
4.公司默认的抽提方式TRIZOL，如果需要试剂盒抽提，则需要客户提供；
5.标本公司免费保存一个月，一个月以后自行处理，如果需要邮寄，则需要客户付邮寄费用。
动物实验
