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分子生物学实验
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芯片

1、microRNA芯片
RNA干扰(RNA Interference, RNAi)现象是一种进化上保守的抵御转基因或外来病毒侵犯的防御机制。将含有靶基因mRNA同源互补序列的RNA(Double strand RNA, dsRNA)导入细胞后,能够特异地识别该mRNA,引起mRNA的降解,从而导致相应的功能缺失。RNAi提供了一种经济、快捷、高效的抑制特异基因表达的技术手段,该技术已被广泛用于研究基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤基因治疗领域。目前常用的RNA干扰手段为miRNA、 shRNA 和siRNA等。
MiRNA是一类可以通过RNAi机制调节基因表达的内源性小RNA,人工miRNA与shRNA的设计原理基本相同,由于miRNA具有内源性,因此其更易产生有效的基因沉默。
  
2、LncRNA芯片
Long non-coding RNAs(lncRNAs)是一类转录本长度超过200 nt的功能性非编码RNA分子。目前的研究已证实,lncRNA参与X染色体沉默,基因组印记以及染色质修饰,转录激活,转录干扰,核内运输等多种重要调控过程。随着对lncRNA在哺乳动物进化及人类疾病发生发展中作用的日益关注,lncRNA调控机制已成为当前遗传学研究的热点问题。
 
筛选出差异表达的lncRNA是研究其在人类疾病发生中所扮演角色的基础。富衡生物为用户提供高通量的lncRNA芯片进行lncRNA表达谱分析,该芯片基于Agilent的SurePrint技术生产,实验稳定可靠。
 
3、基因芯片
基因芯片广泛用于模式物种的DNA、RNA和表观遗传等研究。YuJinBio提供SNP芯片、RNA芯片、甲基化芯片分析服务,涵盖人类和主要模式物种。
 
4、Luminex芯片
Luminex xMAP(multi-analyte profiling)技术,又称流式荧光技术、液态芯片。该技术以抗体为基础,以荧光编码微球为核心,整合了激光检测、应用流体学、高速数字信号和计算机运算法则等多项技术,实现了多因子的高通量检测。
目前, Luminex xMAP技术已被广泛应用于临床诊断、生物制药、生物医学研究等领域,成为医学诊断技术和疾病机制研究等的重要发展方向。
把直径为5.6 μm的骤苯乙烯小球(或6.5μm的磁珠)用荧光染色的方法进行编码,通过调节荧光染料的不同配比获得多达500种不同特征荧光谱的微球,将每种编码微球共价交联上针对特定检测物的抗原、抗体或核酸探针等捕获分子。微球混合后加入微量待检样本,悬液中的靶分子与微球表面交联的捕获分子特异性结合,在一个反应孔肉同时完成多达500种不同的检测反应。最后用Luminex 200或FLEXMAP 3D进行检测,仪器通过两束激光分别对两只另微球的编码和检测微球上报告分子的荧光强度,从而实现对目的因子的定量分析。
 
5、 表达谱芯片
是采用cDNA或寡核苷酸片段作探针,固化在芯片上;将待测样品(处理组)与对照样品的mRNA以两种不同的荧光分子进行标记,然后同时与芯片进行杂交,通过分析两种样品与探针杂交的荧光强度的比值,来检测基因表达水平的变化。
RNA 提取,之后反转录成CDNA,体外转录合成cDNA,荧光标记,cRNA片段化,芯片杂交,洗涤,扫描。
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